Актуальность. Терапия химерными антигенными рецепторами (CAR-T) демонстрирует значительный потенциал в онкологии, однако ее применение при солидных опухолях, в частности при раке яичников, сопряжено с рядом ограничений. Разработка новых векторов Т-лимфоцитов, специфичных к опухолевым антигенам, требует всесторонней доклинической оценки, включая изучение фармакокинетического профиля. Цель. Установление основных фармакокинетических параметров разработанного ВТЛП-CAR-T продукта, направленного на терапию опухолей, экспрессирующих антиген СА125. Материалы и методы. Исследование проведено на беспородных мышах и кроликах. Животным однократно внутривенно вводили генно-модифицированные плазмидой CA125 Т-лимфоциты в дозе 106 клеток в инъекцию. Параметры фармакокинетики оценивали путем количественного определения плазмидной ДНК в мононуклеарной фракции клеток крови и гомогенатах внутренних органов методом ОТ-ПЦР в течение 30 сут. после введения. Результаты. Установлено, что максимальная концентрация плазмидной ДНК в крови животных достигается через 30 мин. после инъекции. Показано быстрое снижение концентрации в течение первых суток с последующим выходом на плато (11,2 – 13,0 % от Сmax в период от 3-х до 12-ти сут.). К 30-м суткам концентрация приближалась к фоновым значениям. Отмечена быстрая дистрибуция ВТЛП в паренхиматозные органы: максимальные концентрации в селезенке (44,8 ± 8,98 пг/мл), печени (25,4 ± 4,56 пг/мл), легких (18,9 ± 3,87 пг/мл) и тимусе (12,3 ± 2,54 пг/мл) также регистрировались через 30 мин. Модифицированные лимфоциты и плазмидная ДНК персистировали в исследованных тканях в течение всего периода наблюдения (30 сут.). Обсуждение. Полученные в ходе исследования фармакокинетические параметры разработанного ВТЛП CAR-T на основе плазмидной ДНК демонстрируют характерную для клеточных продуктов динамику распределения и персистенции. Максимальная концентрация плазмидной ДНК в крови (Cmax = 124,18 ± 7,31 пг/мл), зафиксированная через 30 мин после внутривенного введения, согласуется с данными литературы о быстрой начальной фазе распределения адоптивно перенесенных Т-лимфоцитов в системном кровотоке. Быстрое снижение концентрации в течение первых суток (до 18 % от Cmax на вторые сутки) объясняется активной миграцией клеток в паренхиматозные органы, что подтверждается высокими значениями концентрации в селезенке, печени и легких уже через 30 мин после инъекции. В сравнении с вирусными векторами (лентивирусными или ретровирусными), которые обеспечивают стабильную интеграцию гена CAR, плазмидная трансфекция часто характеризуется более транзиторной экспрессией [28]. Однако в данном исследовании отмечен выход на плато концентрации (11,2 – 13,0 % от Cmax) в период с 3-х по 12-е сутки с сохранением детекции модифицированных клеток до 30 сут. Распределение ВТЛП в органы ретикулоэндотелиальной системы (селезенка, печень) является типичным для внутривенного пути введения клеточных препаратов. Важным результатом является обнаружение плазмидной ДНК в тимусе, что может указывать на потенциальную возможность хоуминга модифицированных клеток в органы иммунопоэза. Практическая значимость проведенного исследования заключается в научном обосновании безопасности и предсказуемости фармакокинетического профиля нового ВТЛП CAR-T. Установленные параметры распределения позволяют оптимизировать протоколы доклинических исследований эффективности, определяя временные интервалы для оценки противоопухолевого ответа. Короткий цикл производства продукта (48 – 72 ч) в сочетании с подтвержденной способностью к персистенции в течение 30 сут. делает данную технологию перспективной для клинического применения, сокращая время ожидания терапии для пациентов с быстропрогрессирующим раком яичников. Заключение. Полученные фармакокинетические данные подтверждают способность разработанного CAR-T продукта к быстрой дистрибуции и достаточной персистенции в организме экспериментальных животных, что является критически важным фактором для обеспечения пролонгированного противоопухолевого эффекта. Полученные значения фармакокинетических показателей обосновывают дальнейшее формирование терапевтической стратегии.
