Лабораторная и клиническая

медицина. Фармация

Научно-практический ежеквартальный рецензируемый журнал

ISSN 2712-9330 (Online)

  • Сквозной номер выпуска: 5
  • Страницы статьи: 37-56
  • Поделиться:

Рубрика: Оригинальные статьи

Цель исследования. Провести оценку дисперсии ДНК-фрагментов сперматозоидов у мужчин с бесплодием с помощью первого российского набора реагентов.
Материал и методы. За период июль–август 2022 г. 492 образца эякулята мужчин в возрасте от 23 до 59 лет с бесплодием были исследованы с помощью набора ГЕМСТАНДАРТ–ГалоСперм Л&К (далее, Набор или Гало-тест). Полученные результаты выражали в процентах как индекс фрагментации ДНК сперматозоидов (ФДНКС) или DFI, % (DNA Fragmentation Index). Проводили оценку результатов Гало-теста согласно следующим пороговым значениям: норма: DFI ? 15 %, сомнительный результат: DFI > 15 % до < 25 %, патология: DFI > 25 %.
За месяц до выполнения Гало-теста, все обследуемые мужчины (n = 492) получили результаты спермограммы,где были выявлены различные сценарии патоспермии, а также нормоспермия. Статистическую обработку результатов проводили с помощью GraphPad Prism 8.0.1 и Microsoft? Excel? для Microsoft 365 MSO (версия 2201), использовали коэффициент корреляции Пирсона для параметрической статистики, описательная статистика.
Результаты. Отсутствие ФДНКС было установлено у 54,1 % (266/492 = 54,1 %) мужчин, средний возраст которых составил 36,58 лет (DFI ? 15 %); отмечена слабая прямая корреляция между нормальным уровнем ФДНКС и астенозооспермией (r = 0,20; p < 0,0001) и вискозипатией (r = 0,13; p < 0,0001); слабая обратная корреляция с олигоастенотератозооспермией (r = – 0,12; p < 0,0001); отмечено отсутствие пиоспермии.
Сомнительный результат по наличию ФДНКС установлен у 21,3 % (105/492 = 21,3 %) мужчин, средний возраст которых составил 38,71 года (DFI в диапазоне от > 15 до < 25 %); отмечена слабая прямая корреляция между сомнительным уровнем ФДНКС и олигоастенотератозооспермией (r = 0,24; p < 0,0001), олигоспермией (r = 0,23; p < 0,0001) и средним возрастом 39 лет (r = 0,17; p < 0,0001); слабая обратная зависимость с астенозооспермией (r = – 0,22; p < 0,0001).
ФДНКС была обнаружена у 24,6 % (121/492 = 24,6 %) мужчин, средний возраст которых составил 41,55 года (DFI > 25 %); отмечена слабая прямая корреляция между высоким уровнем ФДНКС и средним возрастом 44 года (r = 0,28; p < 0,0001).
Во всей обследуемой выборке бесплодных мужчин (n = 492) установлена слабая прямая корреляция между уровнем ФДНКС и возрастом (r = 0,1563; p = 0,0005), олиастенотератозооспермией (r = 0,19; р ? 0,0001), пиоспермией (r = 0,29; р ? 0,0001) и некрозооспермией (r = 0,16; р = 0,0004).
Заключение. Результаты настоящего исследования показали, что набор ГЕМСТАНДАРТ–ГалоСперм Л&К дополняет рутинную спермограмму, предоставляя конкретную информацию клиницисту о качестве генетического материала эякулята.
Жанна Юрьевна Сапожкова – к.м.н., руководитель Международной Школы Цитологии и Медицинской Школы Инновации?, Москва, Россия; руководитель клинико-диагностической лаборатории, Подольский диагностический центр, Подольск, Россия. E-mail: Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript..
Константин Игоревич Еремин – к.х.н., специалист департамента научно-исследовательской лаборатории клинических разработок, Международная Школа Цитологии и Медицинская Школа Инновации?, Москва–С-Петербург, Россия. E-mail: Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript..
Ольга Игоревна Пацап – к.м.н., научный сотрудник, Научно-образовательный ресурсный центр инновационных технологий иммунофенотипирования, цифрового пространственного профилирования и ультраструктурного анализа (молекулярной морфологии), ФГАОУ ВО ?Российский университет дружбы народов?, Москва, Россия. E-mail: Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript..
1. Aitken R.J., Bronson R., Smith T.B., et al. The source and significance of DNA damage in human spermatozoa; a commentary on diagnostic strategies and straw man fallacies // Mol Hum Reprod. 2013. Vol. 19. P. 475-485.
2. Aitken R.J., De Iuliis G.N. On the possible origins of DNA damage in human spermatozoa // Mol Hum Reprod. 2010. Vol. 16, N 3.
3. Agarwal A., Said T.M. Role of sperm chromatin abnormalities and DNA damage in male infertility // Hum Reprod Update. 2003. Vol. 9. P. 331-345.
4. Aitken R.J. Impact of Oxidative Stress on Male and Female Germ Cells: Implications for Fertility // Reproduction. 2020. Vol. 159, N 4. P. 189-201. DOI: 10.1530/REP19-0452
5. Agarwal A., Parekh N., Panner Selvam M.K., et al. Male Oxidative Stress Infertility (MOSI): Proposed Terminology and Clinical Practice Guidelines for Management of Idiopathic Male Infertility // World J. Mens Health. 2019. Vol. 37, N 3. P. 296-312. DOI: 10.5534/wjmh. 190055
6. Estevesт S.C. Interventions to prevent sperm DNA damage effects on reproduction // Advances in Experimental Medicine and Biology. 2019. Vol. 1166. P. 119-148. DOI: 10.1007/978-3-030-21664-1_8
7. McQueen D.B., Zhang J., Robins J.C. Sperm DNA fragmentation and recurrent pregnancy loss: a systematic review and meta-analysis // Fertil Steril. 2019. Vol. 112. P. 54-60.
8. Zheng W.W., Song G., Wang Q.L., et al. Sperm DNA damage has a negative effect on early embryonic development following in vitro fertilization // Asian J Androl. 2018. Vol. 20. P. 75-79. Доступно по: https://www.ajandrology.com/text.asp?2018/20/1/75/209295. Ссылка активна на 28.08.2022.
9. Hamilton T.R.D.S., Assump??o M.E.O.D. Sperm DNA fragmentation: causes and identification // Zygote. 2020. Vol. 28, N 1. P. 1-8. DOI: 10.1017/S0967199419000595
10. Dutta S., Henkel R., Agarwal A. Comparative analysis of tests used to assess sperm chromatin integrity and DNA fragmentation. // Andrologia. 2021. Vol. 53, N 2. DOI: 10.1111/and.13718
11. Who laboratory manual for the examination and processing of human semen. Sixth Edition // World Health Organization. 2021.
12. Henkel R., Kierspel E., Hajimohammad M., et al. DNA fragmentation of spermatozoa and assisted reproduction technology // Reprod Biomed Online. 2003. Vol. 7. P. 477-484.
13. Seli E., Gardner D.K., Schoolcraft W.B., et al. Extent of nuclear DNA damage in ejaculated spermatozoa impacts on blastocyst development after in vitro fertilization // Fertil Steril. 2004. Vol. 82. P. 378-383.
14. Lin M.H., Kuo-Kuang L.R., Li S.H., et al. Sperm chromatin structure assay parameters are not related to fertilization rates, embryo quality, and pregnancy rates in in vitro fertilization and intracytoplasmic sperm injection, but might be related to spontaneous abortion rates // Fertil Steril. 2008. Vol. 90. P. 352-359.
15. Lewis S.E., Agbaje I., Alvarez J. Sperm DNA tests as useful adjuncts to semen analysis // Syst Biol Reprod Med. 2008. Vol. 54. P. 111-125.
16. Evenson D.P. Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA): 30 years of experience with the SCSA // Sperm Chromatin: Biological and Clinical Applications in Male Infertility and Assisted Reproduction. 2011. P. 125-149. DOI: 10.1007/978-1-4419-6857-9_9
17. Robinson L., Gallos I.D., Conner S.J., et al. The effect of sperm DNA fragmentation on miscarriage rates: a systematic review and metaanalysis // Hum Reprod. 2012. Vol. 27. P. 2908-2917.
18. Muratori M., De Geyter C. Chromatin condensa-tion, fragmentation of DNA and differences in the epigenetic signature of infertile men // Best Pract Res Clin Endocrinol Metab. 2019. Vol. 33, N 1. P. 117-126. DOI: 10.1016/j.beem.2018.10.004
19. Esteves S.C., Santi D., Simoni M. An update on clinical and surgical interventions to reduce sperm DNA fragmentation in infertile men // Andrology. 2020. Vol. 8, N 1. P. 53-81. Доступно по: https://doi.org/10.1111/andr.12724.
20. Javed A., Talkad M.S., Ramaiah M.K. Evaluation of sperm DNA fragmentation using multiple methods: a comparison of their predictive power for male infertility // Clin Exp Reprod Med. 2019. Vol. 46. P. 14-21.
21. Sandro C.Е., Carmen L.F., Mercedes G.M., et al. Reliability of the sperm chromatin dispersion assay to evaluate sperm deoxyribonucleic acid damage in men with infertility // Fertility and Sterility. 2022. Vol. 117, N 1. P. 64-73. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2021.08.045
22. МсEvoy A., Roberts P., Yap K. Development of a simplified method of human semen storage for the testing of sperm DNA fragmentation using the Halosperm G2 test kit // Fertil Steril. 2014. Vol. 102. P. 981-988.
23. Fernandez J.L., Muriel L., Goyanes V., et al. Simple determination of human sperm DNA fragmentation with an improved sperm chromatin dispersion test // Fertil Steril. 2005. Vol. 84. P. 833-842.
24. Fernandez J.L., Cajigal D., Lopez-Fernandez C., et al. Assessing sperm DNA fragmentation with the sperm chromatin dispersion test // Methods Mol Biol. 2011. Vol. 682. P. 291-301.
25. Simon L., Proutski I. Sperm DNA damage has negative association with live birth rates after IVF // Reprod. Biomed. 2013.
26. Sheena E.M. The impact of sperm DNA damage in assisted conception and beyond: recent advances in diagnosis and treatment // Reproductive BioMedicine Online. 2013.
27. Jungwirth A., Giwercman A., Tournaye H., et al. European Association of Urology Working Group on Male Infertility // European Association of Urology guidelines on Male Infertility. 2012. Vol. 62. P. 324-332.
28. Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine. The clinical utility of sperm DNA integrity testing: a guideline // Fertil Steril. 2013. Vol. 99. P. 673-677.
29. Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine. Diagnostic evaluation of the infertile male: a committee opinion // Fertil Steril. 2015. Vol. 103. P. 18-25.
30. Bach P.V., Schlegel P.N. Sperm DNA damage and its role in IVF and ICSI // Basic and Clinical Andrology. 2016. Vol. 26. P. 15.
31. Esteves S.C., Agarwal A., Cho C.L., et al. A Strengths-Weaknesses-Opportunities – Threats (SWOT) analysis on the clinical utility of sperm DNA fragmentation testing in specific male infertility scenarios // Transl Androl Urol. 2017. Vol. 6, N 4. P. 734-760.
32. Боровец С.Ю., Егорова В.А., Гзгзян А.М., Аль-Шукри С.Х. Фрагментация ДНК сперматозоидов: клиническая значимость, причины, методы оценки и коррекции // Урологические ведомости 2020. Т. 10, № 2. С. 173-180. Доступно по: https://doi.org/10.17816/uroved102173-180.
33. Aitken R.J. DNA damage in human spermatozoa; important contributor to mutagenesis in the offspring // Transl Androl Urol. 2017. Vol. 6, N 4. P. 761-764.
34. Translational Andrology and Urology // Sperm DNA Fragmentation. 2017. Vol. 6, N 4. Доступно по: http://tau.amegroups.com/issue/view/612.
35. Esteves S.C., Agarwal A., Majzoub A. The complex nature of the sperm DNA damage process // Transl Androl Urol. 2017. Vol. 6, N 4. P. 557-559.
36. Majzoub A., Agarwal A., Cho CL., et al. Sperm DNA fragmentation testing: across sectional survey on current practices of fertility specialists // Transl Androl Urol. 2017. Vol. 6, N 4. P. 710-719.
37. Вспомогательные репродуктивные технологии и искусственная инсеминация (протокол лечения) // Клинические рекомендации МЗ РФ 05 марта 2019 г. № 15-4/и/2-1908. Доступно по: https://rahr.ru/d_pech_mat_metod/ВРТ1.pdf.
38. Мужское бесплодие // Клинические рекомен-дации. 2021. Доступно по: https://cr.minzdrav.gov.ru/ schema/5_2. Ссылка активна на 28.08.2022.
39. Coughlan C., Clarke H., Cutting R., et al. Sperm DNA fragmentation, recurrent implantation failure and recurrent miscarriage // Asian J Androl. 2015. Vol. 17. P. 681-685.
40. Simon L., Zini A., Dyachenko A., et al. A system-atic review and meta-analysis to determine the effect of sperm DNA damage on in vitro fertilization and intracytoplasmic sperm injection outcome // Asian J Androl. 2017. Vol. 19. P. 80-90.
41. Gos?lvez J., Caballer P., L?pez?Fern?ndez C., et al. Can DNA fragmentation of neat or swim?up spermatozoa be used to predict pregnancy following ICSI of fertile oocyte donors? // Asian Journal of Andrology. 2013. Vol. 15. P. 812-818. DOI: 10.1038/aja.2013.74
42. Lopes S., Sun J.G., Jurisicova A., et al. Sperm deoxyribonucleic acid fragmentation is increased in poor-quality semen samples and correlates with failed fertilization in intracytoplasmic sperm injection // Fertil Steril. 1998. Vol. 69. P. 528-532.
43. Virro M.R., Larson-Cook K.L., Evenson D.P. Sperm chromatin structure assay (SCSA) parameters are related to fertilization, blastocyst development, and ongoing pregnancy in in vitro fertilization and intracytoplasmic sperm injection cycles // Fertil Steril. 2004. Vol. 81. P. 1289-1295.
44. Borini A., Tarozzi N., Bizzaro D., et al. Sperm DNA fragmentation: paternal effect on early postimplantation embryo development in ART // Hum Reprod. 2006. Vol. 21. P. 2876-2881.
45. Simon L., Castillo J., Oliva R., et al. Relationships between human sperm protamines, DNA damage and assisted reproduction outcomes // Reprod Biomed Online. 2011. Vol. 23. P. 724-734.
46. Simon L., Lutton D., McManus J., et al. Sperm DNA damage measured by the alkaline Comet assay as an independent predictor of male infertility and in vitro fertili-zation success // Fertil Steril. 2011. Vol. 95. P. 652-657.
47. Saleh R.A., Agarwal A., Kandirali E., et al. Leukocytospermia Is Associated with Increased Reactive Oxygen Species Production by Human Spermatozoa // Fertil. Sterility. 2002. Vol. 78, N 6. P. 1215-1224. DOI: 10.1016/s0015-0282(02)04237-1
48. Agarwal A., Mulgund A., Alshahrani S., et al. Re-active Oxygen Species and Sperm DNA Damage in Infertile Men Presenting with Low Level Leukocytospermia // Reprod. Biol. Endocrinol. 2014. Vol. 12, N 126. DOI: 10.1186/1477-7827-12-126

Статью можно приобрести
в электронном виде!

PDF формат

Бесплатно

DOI: 10.14489/lcmp.2022.03.pp.037-056
Тип статьи: Научная статья
Покупка физ. лицом Покупка юр. лицом

Ключевые слова

Для цитирования статьи

Сапожкова Ж. Ю., Еремин К. И., Пацап О. И. Оценка дисперсии ДНК-фрагментов сперматозоидов у мужчин с бесплодием: из клинических исследований первого российского набора ГЕМСТАНДАРТ–ГалоСперм Л&К // Лабораторная и клиническая медицина. Фармация. 2022. Т. 2, № 3. С. 37 – 56. DOI: 10.14489/lcmp.2022.03.pp.037-056